O VIH desenvolve rápidamente a resistencia á "técnica de curación de xenes"

A resistencia pode ser o talón de Aquiles da enxeñería xenética

Desenvolva resistencia á terapia ata 8 días

Unha das "técnicas literalmente leva ao virus a resistencia contra si mesmo

Nun contratempo para un enfoque innovador para curar a VIHOs investigadores implicados nunha técnica que usa enzimas para eliminar xenes virais do ADN das células infectadas descubriron que o VIH se adapta facilmente a esta acción e desenvolve rapidamente a resistencia á guía que conduce ás moléculas diana que levan a parte correcta dunha secuencia. de ADN celular humano. Os virus resistentes tamén poden desenvolver unha cepa máis agresiva do virus e replicarse aínda máis rápido que os virus non expostos á terapia xénica (aínda que aínda son susceptibles a medicamentos antirretrovirais convencionais (ARVs)).

Ademais, os investigadores suxiren como a terapia xénica realmente pode promover o desenvolvemento da resistencia, xa que funciona activamente para crear pequenas mutacións no lugar onde se corta o ADN celular. A resistencia xorde rapidamente - dentro de 8 días despois de que a primeira aplicación da terapia se active.

Isto non significa que toda a aproximación á edición de xenes estea condenada ao fracaso, pero isto implica que o xene enzimático degradante ten que estar unido a unha gran variedade de diferentes "xenes de sondas" deseñados para achegar un maior número de puntos diferentes. do ADN viral oculto dentro do ADN humano nas células infectadas.

A tecnoloxía xenética implica o transporte dun encima-ADN chamado CRISPR degradante ou cas9 no corazón do núcleo celular humano. A enzima cas9 que se atopaba orixinalmente dentro das bacterias como defensa natural contra o virus, está unida a unha única lonxitude da cadea "guía" (ARN sgRNA) que guía o cas9 á parte específica do ADN infiltrado polo VIH no seu proceso de integración do ARN convertido recentemente en ADN que debe ser eliminado para eliminar o "control" do VIH sobre a célula, poñendo así fin ao ciclo de vida VIH.

O concepto non é moi diferente da terapia xénica versátil chamada ARN interferente curto (siRNA), que está a ser investigada para a unha serie de enfermidades que inclúen a hepatitis B crónica (esta ligazón leva a un texto noutro sitio, en inglés, que tamén se traducirá). Pero tendo en conta que os brancos de siRNA e a degradación do "RNA messenger" e as moléculas de órganos que actúan como máquinas de replicación de virus dentro da parte principal do citoplasma da célula () sgRNA / cas9 Meta de ADN integrado, o modelo "Master" para facer retrovirus como o VIH insire as instrucións xenéticas existentes no núcleo celular e non no citoplasma circundante nun núcleo celular.

Este estudo

Neste estudo in vitro os investigadores de células T infectados con tres diferentes "sondas de xenes " sgRNA / cas9 deseñado para diferentes seccións do ADN do VIH integrado no núcleo celular.

Un, chamado T4, está ligado ao gag / pol do xenoma do VIH, que inclúe espazo para a función do VIH equivalente a unMáquina copiadora de ADN"; un segundo xene, T10, está unido ao env / rev, que inclúe as instrucións para formar a "sobre viral ". Nestes dous casos o sgRNA en si conectado a un único punto específico de ADN viral é escindido en dúas partes, o que permite a cas9 degradar o consellos rotos de ADN aínda viral.

Un mecanismo intracelular de reparación molecular chamado NHEJ (remontables non homólogos finais) eventualmente repara as puntas de ADN trituradas, pero o ADN é máis propenso a "Erros" e introducir cambios na cadea de ADN, algúns dos cales poden conferir resistencia ao VIH.

O terceiro xene da sonda, chamado LTR-B, foi similar ao empregado nun estudo que informamos a finais de marzo (Tamén se abre noutro sitio en inglés e trataremos de traducilo de xeito oportuno). Isto reduce o ADN nos dous puntos que se localizan na secuencia chamada Litros ou preto dela (repetición de termo longo en tradución libre e interpretativa - suxestións coherentes aceptadas) que representan os puntos finais do material xenético do VIH. Deste xeito realiza unha eliminación completa de todos os materiais compoñentes do VIH da célula infectada.

Unha das implicacións de LTR-B é, como sempre, a resistencia se a célula segue sendo capaz de producir o VIH, que en teoría podería ser capaz de facelo, porque hai algunhas partes restantes do ADN que, aínda que son defectuosas, aínda é capaz de producir. virus infeccioso. Debe ser porque o ADN do VIH pode ter sido sometido a unha mutación nunha forma resistente á "aprehensión" do ARNr en primeiro lugar.

Resultados e implicacións

Produciuse a produción de partículas virales entre as células tratadas con sgRNA / cas9 e as células tratadas con cas9 só. Os investigadores descubriron que, como se esperaba, a replicación viral foi inicialmente gravemente afectada nas células infectadas xene sgRNA / cas9 sonda. En xeral, os niveis pico de produción viral foron inferiores a 83% nas células tratadas con T4, por 95% nos tratados con T10e por aproximadamente 98% nas celas tratadas con LTR-B.

A produción viral comezou uns cinco días despois da infección nas células control. pero foi atrasada durante uns catro días en células tratadas con LTR-B e durante uns dez días nas células tratadas con T4 ou T10. Non obstante, houbo unha produción viral significativa ao final do LTR nas células B, niveis virais na máxima produción de PF - que tamén foi posposto por catro días - Seguía sendo un 55% inferior nas células de control. Pero en células tratadas con T10 era exactamente o mesmo nas celas de control - aínda que atrasada por oito días - e foi aproximadamente un 20% maior en células T4. Isto suxire que a resistencia viral ocorre rapidamente.

Nas mostras de virus, 74% de T4, 70% de T10 e 72% dos virus LTR-B tiñan o ADN alterado do xeito esperado por tres diferentes sondas xenéticas. No outro% 16, 20% e 18%, houbo mutacións dalgún tipo e algunhas delas foron atribuídas á xeración de resistencia.

Os investigadores realizaron o experimento de novo en células infectadas polo virus VIH extraídas da produción viral máxima do experimento anterior que se esperaba que se volvese resistente. Os virus resistentes tratados con T4 produciron de novo 20% máis virus que as células control e, no caso das células tratadas con T10, produciron a mesma cantidade de virus que o control celular, pero en realidade alcanzaron o pico de produción viral seis días anterior. Isto suxire que o VIH que se volveu resistente a T4 ou T10 foi polo menos como aplicar un control de replicación de virus ou un instalador.

No caso de LTR-B tratado con virus resistente, a produción viral máxima tamén se alcanzou uns seis días antes do virus control, pero os niveis de produción viral permaneceron inferiores a 30%, o que suxire que os virus LTR resistentes. -B pode estar pagando o prezo dunha pequena resistencia ao seu creador.

No virus resistente a T4, predominou un único punto de mutación (unha mutación xenética con só un "Carta" o cambiou). Isto representaba unha cota de 81% de virus resistentes e outra mutación por punto único representaba 13% deles. En virus resistentes a T10, mentres que unha mutación por punto único representaba 38% de virus resistentes a outros virus resistentes tiña, en xeral, unha mutación máis complexa de puntos de cambios 3 ou 4.

A resistencia dos virus resistentes a LTR-B era máis inusual. T4 e T10 só extraeron pequenas partes do xenoma viral; se é así reparada incorrectamente, isto pode crear cepas resistentes. Neste caso é a maquinaria celular NHEJ, que remonta ao ADN "editado" de xeito incorrecto, que é o núcleo da resistencia. Pero o LTR-B debe eliminar todo o xenoma viral, polo que a unión viral de ADN non debería ter a oportunidade de producir virus mutantes. Onde estaba a resistencia? ¿De que ou de que?

Os investigadores descubriron que unha pequena proporción de virus resistentes á T4 e T10, pero todos os virus resistentes ao LTR-B, non tiveron substitucións dunha base xenética a outra, como a maioría dos virus resistentes, pero tiñan seccións enteiras eliminadas ou inseridas. no código xenético - o chamado "Indels".

Isto suxire que foi o sgRNA / cas9 o que causou resistencia nestes casos. Cas9 interrompeu o ADN no sitio de escisión de tal xeito que producía os virus resistentes.

Neste caso, a resistencia non foi causada pola transacción comercial viral en presenza de baixos niveis de drogas, que exercen unha presión evolutiva selectiva - o que se estaba causando foi xerado directamente pola propia droga. En definitiva, o sgRNA / cas9 actuou como un axente mutaxénico, un controlador directo da mutación viral cara á cepa resistente ao propio ARNg / cas9. Nota do editor. En bo portugués lémbrame unha falta de fogo. Este tipo de "disparos", que contra incendios, mata "só" a unha persoa, se sae do control e sae á rúa ...

Algúns medicamentos antivirais non convencionais xeran problemas e traballan porque son mutagens, como a ribavirina, pero neste caso traballan no xenoma viral. Os siRNA tamén poden mostrar mutacións directamente no ARN citoplasmático. Pero esta é a primeira vez que se viu unha proposta para o tratamento do VIH contribuíndo directamente á produción de mutacións resistentes dentro do ADN proviral nas células do corazón.

Aínda que a produción de resistencia sería reducida ao mínimo polo uso de ARNs múltiples, como suxiren os investigadores, este estudo demostra que poden haber esperados retrocesos inesperados polos investigadores sobre como curar o VIH e que a nova edición de xenes e outras técnicas implicadas poden representar riscos propios investigación ou vida, dependendo de como se realice e en que tipo de estudo, in vitro ou humano, e poida xerar problemas graves.

Nota do editor: estou moi feliz cando sinto que podo darlles boas noticias aos lectores e, ademais, progreso na investigación e na tradución destes textos, que ás veces me fan estudar "un pouco de xenética para traducilos ", Faime cada vez máis coidado e pensativo co que publico e non vin, nas miñas fontes, que considero sensato, sen mencionar esta cura que xurdiu en Londres. Odio parecer a Cassandra que anuncia a apocalipse e todo o que pido é atención e precaución. Encantaríame estar absolutamente seguro de que un estudo en concreto conseguiu atopar unha cura para o VIH, pero sei que entre a aplicación desta posible cura debe haber un protocolo de aplicación que, cando sexa pouco, determine un tratamento de X tempo e un período de Tempo de "DELTA" á espera de probas de remisión completa, eliminación de depósitos (os intestinos son unha área moi grande onde o VIH pode agocharse e se permanece oculto alí, para sempre, quizais sexa aceptable como condición médica que leva a a persoa a unha vida sen TARV pero cun complexo calendario de recollida de material para exames para o resto da miña vida e este, aínda que sexa un cura, ten a cara dunha enfermidade, porque estou aquí, as 02:22 simplemente porque tiven un día excelente e crin que a gripe moi sospeitosa que me causou (recibín a vacina) desapareceu e todo o que tiña que facer era deitarme, despois de dez minutos estaba seguro de que non durmiría -0 non estou curado dunha gripe pola que me vacinaron e Non estou, neste momento da miña vida: 52 anos, 22 deles con VIH, maltratados e, para ser honesto, só vou á rúa se me vexo obrigado por un compromiso que non se pode resolver aquí.

Eu era ben selectivo na elección de persoas que podían entrar na miña casa e, tras ser tratado como un idiota por alumnos da ESPM que me enganaron cun cinismo odioso e deplorable (todo o que eu lles pedín foi que non mudasen o meu nome ou que ocultassem miña cara e foi exactamente iso que eles fixeron. Moral da historia: Entrevista, aínda que para estudantes do fundamental, terán que ser pagadas e, doa a quen doer vou mirar o axuste da cámara e facer que os posibles interesados en utilizar o meu traballo para as súas formación profesionais estean sometidas a un contrato con meus inegociáveis ​​termos ou nada. Agradeçam todos os alumnos da ESPM porque foi o comportamento infantil, inmoral, ladino e trampóns que me levou a estas ilações e iso non será mudado at' para o día da miña morte.

Deste xeito, en nome da prudencia. Estamos reunidos en torno a un problema que, falando de forma xenérica, está envolvido por unha imprudencia pura, exquisita e tola. Cantos de nós, e mesmo a min mesmo, non paran nun momento no que se establece a crise de saúde, séntase como voltar no tempo e darlle un bate de baseball na cabeza de "o noso imprudente" e deixarlle unha mensaxe que sería, creo, máis ou menos así. Use o seu condón.

Estou investigando esta suposta cura en Inglaterra. Teño boas fontes e non me enviaron nada. Quizais non hai nada para enviar e todo isto é unha especie de "click-hunting". Ou, quen podería saber (?) Caín en desgraza con eles e terá que buscar máis e máis profundo.

Ben, a gripe non está tranquila e os meus pasos nasais están pechados. Quen pode durmir así?

Vou a Netflix, mira a Luke Cage porque estou morrendo de curiosidade sobre o próximo.

Si, a xente, xogo duro, pero é porque a vida non me deu elección e personaxes como Daredevil, The Punisher, Luck Cage e Jessica Jones lévanme, polo menos por uns minutos, a sensación de que pode haber xustiza ou, polo menos, segundo alguén que está lonxe da noite do tempo, sexa xusto nas contas, e se non podo cobrar o meu, deixe-me irradiar con alegría ao ver "homes xustos" facendo algo que me gustaría moito facer.

Si, rapaza intelixente, camiñei por un longo camiño e, aínda que podo darche moitas verdades, o meu libro deixarache pensando en como che pasei por todo o que lerás. Digo que esta foi a parte doada. Hai unha parte difícil, e non me atrevo a pensar en pola nun documento de Word ... E se os metería nun libro ... lol Ata a próxima vez.

Cau. Esta é unha forma amorosa que unha muller bahiana encantadoramente encantadora elixiu referirse a min. Cando unha muller me chama Cau, o meu corazón late máis rápido, a miña respiración confúndese e todo o que recordo é a frase despois de poñer o preservativo:

"Agora podo ..."

O que veu despois ... Foi un caos ... (...) ... Hai case vinte anos e, ás veces, aínda sinto a amargura da vesícula que se vertía sobre min. E a desagradable pregunta: como conseguirás cando a marea estea alta? Non respondín nada, pero pensei: nadar.

Gus Cairns

Publicado en: 17 Maio de 2016

Traducido por Claudio Souza do Original en O VIH desenvolve rápidamente a resistencia á tecnoloxía de cura xenética por Gus Cairms para AIDSMAP revisado por Mara Macedo

referencia

Wang Z et al. As mutacións derivadas de CRISPR / Cas9 inhiben a replicación de HIV-1 e aceleran a fuga viral. Informes de celas, páxinas 15, 1-9. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.celrep.2016.03.042. Abril 2016.

Temas relacionados

Related news

Related news selected from other sources

Máis opcións de editores a procura dunha cura >

Novas máis populares

  1. EASL emite novas recomendacións de tratamento con hepatite C para todos os xenotipos26 setembro 2016
  2. O modelo holandés considera que PrEP para homes homosexuais de alto risco é rendible a prezos correntes e de aforro de custos a prezos xenéricos27 setembro 2016
  3. O estudo español dá a tranquilidade: os pequenos virus VIH non predicen o fracaso do tratamento21 setembro 2016
  4. Suecia o primeiro país en alcanzar o obxectivo UNAIDS / WHO 90-90-9014 setembro 2016
  5. As taxas de sífilis aumentan entre homes homosexuais en EE. UU., Mostran datos de CDC29 setembro 2016

Un pouco máis para a súa lectura

Ola! A túa opinión sempre importa. ten algo que dicir? Xa está aquí! Algunha pregunta? Podemos comezar aquí!

Este sitio usa Akismet para reducir o spam. Aprende a procesar os teus datos de comentarios.

Automattic, Wordpress e Soropositivo.Org, e eu, facemos todo o que podemos para a súa privacidade. E sempre estamos a mellorar, mellorar, probar e implementar novas tecnoloxías de protección de datos. Os teus datos están protexidos e eu, Claudio Souza, traballo neste blog 18 horas ou día para, entre moitas outras cousas, garantir a seguridade da túa información, xa que sei as implicacións e complicacións das publicacións pasadas e intercambiadas. Acepto a política de privacidade de Soropositivo.Org Coñeza a nosa política de privacidade

%d bloggers gústalles isto: